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平末端DNA加A试剂盒 T4原理载体及其他

  • 型   号:42016
  • 价   格:
  • 更新时间:2025-04-24
  • 厂家性质:经销商

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如该平末端DNA片段需要和T载体相连接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。
平末端DNA加A试剂盒 T4原理载体及其他

平末端DNA加A试剂盒


平末端DNA加A试剂盒 T4原理载体及其他

目录号:42016

试剂盒组成、储存、稳定性:

组成

25次(42016-25)

50次(42016-50)

Taq DNA polymerase

25ml

50ml

10 x A-tailing buffer

25ml

50ml

dATP Mix

25ml

50ml

储存:-20 ℃ 保存。

产品介绍:

PfuHiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如该平末端DNA片段需要和T载体相连接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。

操作步骤:

1.    平末端PCR产物用PCR清洁(无非特异扩增)或者胶回收纯化(有非特异扩增)。

2.    纯化好的平末端DNA片段按以下反应体系加A尾:

平末端DNA片段

1-7ml(不超过1mg)

dATP Mix

1ml

10 x A-tailing buffer

1ml

Taq DNA polymerase

1ml

3.   轻轻混匀后72℃保温20-30 分钟。

4.    加A尾的产物可以不需要再次清洁或者胶回收纯化,取1-2ml直接用于连接反应。

 平末端DNA加A试剂盒 T4原理载体及其他


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