2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
本产品包含Long Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,扩增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 适用于扩增各种长达10Kb的DNA模板!PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆。
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2× Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
目录号:71115
产品内容
产品成份 | 71115-05 | 71115-0100 |
2× Long Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存条件
-20℃保存,有效期2年。经常使用,可置于4°C保存,有效期3个月。
产品简介
本产品包含Long Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,扩增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 适用于扩增各种长达10Kb的DNA模板!PCR产物3’端带A头,纯化后可直接用于TA载体克隆。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
产品特点
1. 高产:产量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小时完成 PCR!
3. 高成功率:对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果!
2 × Long Taq PCR Master Mix 使用说明:
一、 配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component | 20μlReaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×Long Taq PCR Mix | 10 μ | 25 μ | 1 × |
Forward Primer(10 μM) | 0.8 μ | 2 μl | 0.4 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μl | 2 μ | |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:0.1-1 μg;cDNA:1-5 μl 。
二、建议 PCR 循环条件:
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 15 seconds |
30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 60 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事项:
扩增长片段,引物一般终浓度为 0.3-1μM,长度最好为 27-36bp;退火温度一般在 65℃-70℃,使用 2 步扩增法,即退火/延伸合为一步;如果设计的引物在 20bp 左右,则使用 3 步扩增法为好。扩增效果不佳时,还可加入 DMSO 到终浓度 2-4%。
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)