2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相关
本产品包含FastLong Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,扩增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 适用于扩增各种小于10Kb的DNA模板!2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相关
2× FastLong Taq PCR Master Mix(含染料)
2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相关
目录号:71810
产品内容
产品成份 | 71810-05 | 71810-0100 |
2× FastLong Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存条件
-20℃保存,有效期 2 年。经常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 个月。
产品简介
本产品包含FastLong Taq DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×,扩增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 适用于扩增各种小于10Kb的DNA模板!
PCR产物3’端带A尾,纯化后可直接用于TA载体克隆(Cat#V114-20)。
本产品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、测序等后续操作。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品特点
1. 高产:产量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb,一般 0.5 小时完成 PCR!
3. 高成功率:对于高 GC 模板和特殊结构的复杂模板有良好效果!
2× FastLong Taq PCR Master Mix 使用说明:
一、配制 PCR 反应体系:(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×FastLongTaqPCRMix | 10 μl | 25 μl | 1 × |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
参考模板用量(50 μl 反应体系):
质粒:0.1-10 ng;细菌基因组:10-100 ng;人类基因组:50-150 ng;cDNA:1-5 μl 。
二、建议 PCR 循环条件:
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initial denaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 10 seconds | 25-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 10 seconds | |
Extension | 72℃ | 10 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事项:
a. 片段≥3kb 或产量较低时,可以采用 15-20 秒/kb 的延伸速度或采用较多循环数。
b. 对于高 GC 含量或者有二级结构的模板,应该适当延长预变性时间到 5 分钟,变性时间可以适当提高 5-10 秒。扩增效果不佳时,还可加入 DMSO 到终浓度 1-8%。
2× FastLong Taq PCR Master Mix PCR相关