唾液DNA收集保存运输提取试剂盒 核酸提取
针对唾液样本中的DNA进行收集、保存、运输、纯化。替代或者配套Oragene 唾液收集管使用。唾液DNA收集保存运输提取试剂盒 核酸提取
唾液DNA收集保存运输提取试剂盒
唾液DNA收集保存运输提取试剂盒 核酸提取
目录号:40319
v 适用范围:
针对唾液样本中的DNA进行收集、保存、运输、纯化。
替代或者配套Oragene 唾液收集管使用。
v 试剂盒组成、储存、稳定性:
试剂盒组成 | 保存 | 10次 (40319-10) | 50次 (40319-50) |
保存液 | 室温 | 2mlx10 | 2mlx5 |
细胞裂解液 | 室温 | 10ml | 50ml |
杂质沉淀液 | 室温 | 17ml | 85ml |
DNA溶解液 | 室温 | 10ml | 20ml |
5ml采集管 | 室温 | 10个 | 50个 |
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1. 细胞裂解液低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2. 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
v 产品介绍:
传统的人类基因组DNA样品的采集往往需要抽血采集并提取全血基因组DNA获得。该方法有几个明显的缺点:需要一定的采血设备并需要具有医务知识的人员来完成;抽血的疼痛造成排斥拒绝采样;侵入性采集增加了感染的可能性;采集后血液样品必须低温运输保存。本试剂盒可提供无疼痛、非侵入性的方法,患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品,受测者排斥性低,婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单,受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量平均达110 μg / 2 mL唾液。
v 产品特点:
1. 非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险,并增加了取检的便利性,可由受检者自行取样。
2. 仅需2ml的唾液样本,即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
3. 采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。
v 唾液样品收集步骤:
1. 用清水漱口1~2次,然后吐掉。
2. 漱口后等候至少5分钟方可采集唾液,期间不要进食、饮用各种饮料。
3. 将唾液(不是喉咙中痰液)吐到5ml 采集管中,直至2ml 刻度位置。(不可将痰液吐到收集管中,若唾液不足,可做口舌运动,促进分泌。浮在唾液上层的少量泡沫不包括计算在2ml唾液采集量内,采集过程必须在30分钟内完成)
4. 将等体积2ml保存液全部倒在5ml唾液采集管中,充分颠倒混匀后旋紧盖子。
v 唾液DNA提取步骤(2ml唾液量举例,可按比例放大缩小每次提取的唾液量):
细胞裂解
1. 将保存液/唾液混合物放置于50°C 水浴中至少1小时或50°C空气孵箱至少2小时。
2. 转移4ml混合物 (2 ml 唾液加2 ml保存液)到一个15 ml或者50 ml 的离心管。加入1ml裂解液和10 μl RNase A 溶液(10mg/ml). 高速涡旋振荡10秒后室温放置 10分钟。
杂质沉淀
3. 加入1. 7 ml杂质沉淀液到上述裂解混合物中。高速涡旋振荡25秒,充分混匀杂质沉淀液和裂解混合物。
4. 8,000xg离心5分钟。沉淀的杂质和蛋白会在管底形成一个致密的沉淀团。如果蛋白沉淀不太致密,可以冰上放置5 分钟,然后重复步骤4。
DNA 沉淀
5. 仔细转移上清(含有 DNA)到一个新的15 ml或者50 ml 的离心管。注意不要触动管底沉淀。加入5ml异丙醇。(唾液DNA含量较低时,加入40μl Glycogen 20mg/ml可能提高一些产量),轻柔颠倒混匀50次(有时可以看见沉淀)。
6. 2,500xg离心3分钟,此时一般可在管底看到白色的DNA沉淀。
7. 倒弃上清,倒置后在吸水纸上轻敲几下以尽可能吸干。加入5ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA沉淀。
8. 2,500 x g离心1分钟, 仔细倒去上清(沉淀很松,注意不要把DNA沉淀倒掉了)。
9. 倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟(不要干过头,也不要残留乙醇)。
DNA 溶解水化
10. 加入250μl -400μl DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀,轻弹管壁混匀。
11. 可以放置在65℃温育30-60分钟(不要超过一小时),然后在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA,中间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
12. DNA可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20°C或者-80°C。
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