超纯超快土壤基因组DNA快速提取试剂he
FastBeat 土壤 DNA 试剂盒可在不到 40 分钟的时间内直接从土壤样品中快速高效地分离 PCR 即用型基因组 DNA。设计用于磁珠打浆设备，例如 MP Biomedicals 的 FastPrep® 仪器，可在 40 秒内轻松裂解土壤生物种群。超纯超快土壤基因组DNA快速提取试剂he
FastBeat Soil DNA Kit (Bead Beating) FastBeat 土壤 DNA 提取试剂he（珠磨法）
超纯超快土壤基因组DNA快速提取试剂he
目录号：40415
v Kit Contents and Storage
Kit Contents | Storage | 50 Preps (40415-50) |
Bead Tube | RT | 50 |
Sodium Phosphate Buffer | RT | 50 ml |
MT Buffer | RT | 6 ml |
PPS Solution | RT | 13 ml |
IRS Solution | RT | 15 ml |
PQ Solution | RT | 35 ml Add indicated ethanol before first use |
Buffer WB | RT | 13 ml Add indicated ethanol before first use |
Elution Buffer | RT | 15 ml |
DNA Bind Columns | RT | 50 |
v 所有试剂在指ding温度下储存时，可稳定保存 9 个月。
描述
FastBeat 土壤 DNA 试剂盒可在不到 40 分钟的时间内直接从土壤样品中快速高效地分离 PCR 即用型基因组 DNA。设计用于磁珠打浆设备，例如 MP Biomedicals 的 FastPrep® 仪器，可在 40 秒内轻松裂解土壤生物种群。将样品放入含有 3 种珠子的 2.0 ml 管中，珠子是陶瓷和二氧化硅颗粒的混合物，旨在有效裂解所有土壤生物，包括历史shang难以溶解的来源，如真细菌孢子和内生孢子、革兰氏阳性菌、酵母、藻类、线虫和真菌。
v 该套件使用一种新颖的专有方法来去除高腐植酸含量，包括堆肥、沉积物和粪便等难处理的土壤类型。分离的 DNA 纯度高，可以更成功地从样品中对生物体进行 PCR 扩增。已经进行了 PCR 分析以检测多种生物体，包括细菌（例如枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌）、真菌（例如酵母、霉菌）、藻类和放线菌（例如链霉菌）。
v使用前的重要注意事项
向样品中加入磷酸钠和 MT 缓冲液后，微珠管中的填充体积应在样品管中留出足够的空气空间，以便进行高效的 FastPrep® 仪器处理。MP Biomedicals 建议使用 500 mg 起始材料，只要试管中有 250 - 500 μl 的空隙。微珠管过量填充可能导致样品损失或试管故障。珠管盖必须牢固，但不能拧得过紧，以防止样品泄漏。如果样品太大而无法在单个试管中处理，请分样并使用多个试管进行处理。这些试剂盒已在 FastPrep® 仪器中进行了严格测试。在 FastPrep® 仪器中以 6.0 的速度运行一次 40 秒就足以裂解几乎所有样品。如果用户通过实验确定需要额外的处理时间，则应在连续的 FastPrep® 仪器匀浆之间将样品在微珠管中的冰上孵育至少 2 分钟If you use other bead beater device, please follow instruction manual from manufaturer to set appropriate parameter for good performance.
操作步骤
ð 注意：
1. shou次使用前，将规定量的乙醇加入PQ溶液瓶中，缓冲WB瓶中，混匀，并在瓶子上打勾。
2.向微珠管中加入多达 500 mg 的土壤样品。
3.将980μl磷酸钠缓冲液添加到磁珠管中的样品中。温和的 votex 混合。加入120μl MT 缓冲液。
ð 注意：
检查MT缓冲区。如果 MT 缓冲液沉淀，请在使用前将溶液加热至60°C直至溶解。
在 FastPrep® 仪器中以6.0的速度设置40秒。Centrifuge at 12,000xg for 5minutes to pellet debris.
将上清液转移至干净的 2.0 ml 离心管中。加入 250 μl PPS 溶液，用手摇动试管 10 次混合。在 4°C 下孵育 5 分钟。
在室温下以 10,000 x g 离心管 3 分钟。避免沉淀，将最多 900 μl 上清液转移到干净的 2 ml 离心管中，但不超过 900 μl。
加入 300 μl IRS 溶液（1/3 体积）并短暂涡旋。在 4°C 下孵育 5 分钟。
在室温下以 10,000 x g 离心管 1 分钟。避免沉淀，将上清液转移到干净的 5 ml 离心管中。
向澄清的上清液中加入 1.5 体积的 PQ 溶液，并通过移液混合。
示例：向 1100 μl 裂解物中加入 1650 μl PQ 溶液。如果回收的上清液较少，则相应地减少 PQ 溶液的量。加入乙醇后可能会形成沉淀，但这不会影响程序。
注意：确保已将乙醇添加到 PQ 溶液中。
注意：将 PQ 溶液直接滴加到已澄清的上清液中，并立即混匀，这一点很重要。
将约 700 微升混合液加入离心过滤器（置于收集管中），在室温下以 10,000×g 离心 1 分钟。弃去滤液。再加入 700 微升，重复操作，直至所有剩余混合液都加入离心过滤器。
注意：每个样本处理可能需要 4 至 5 次加载。
向离心过滤器中加入 600 微升 WB 缓冲液，在室温下以 10,000×g 离心 30 秒。弃去滤液。用另外600微升WB缓冲液重复步骤 11。
注意：确保向 WB 缓冲液中加入乙醇。
在室温下以 13000×g 的离心力离心旋转过滤器 2 分钟，使旋转过滤器干燥。
将离心柱过滤器小心放入干净的 1.5 毫升离心管中。避免缓冲液 WB 溅到离心柱过滤器上。向柱膜中心加入 100 微升洗脱缓冲液（可选：将水预热至 70 - 90 摄氏度可提高 DNA 产量）。在室温下孵育 3 - 5 分钟，然后以 13000 x g 离心 1 分钟以洗脱 DNA。
注意：使用较小体积（最小 30 微升）的洗脱缓冲液可获得更高浓度。
可选：将洗脱液放回离心柱中再洗脱一次。这可使 DNA 浓度提高约 10 - 15%。
超纯超快土壤基因组DNA快速提取试剂he
