真菌基因组DNA快速提取试剂he(离心柱型)
适用于从多种真菌的不同部位的组织中快速提取高质量的基因组DNA,du特配方的缓冲液体系能有效去除植物组织中的多糖、多酚复合物和酶抑制剂,基因组DNA选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心等步骤,去除其他杂质。真菌基因组DNA快速提取试剂he(离心柱型)
FlashPure fungus GenomicDNA Kit
真菌基因组 DNA 提取试剂he
(离心柱型)
真菌基因组DNA快速提取试剂he(离心柱型)
目录号:40411
产品内容:
产品成份 | 40411-50(50 次) | 40411-100(100 次) |
Buffer LP1 | 20 ml | 40 ml |
Buffer LP2 | 10 ml | 20 ml |
Buffer LP3 | 15 ml | 25 ml |
Buffer WB2 | 13 ml | 25 ml |
Buffer EB | 10 ml | 15 ml |
RNase A (10mg/ml) | 250 ul | 500 ul |
DNA 吸附柱和收集管 | 50 套 | 100 套 |
自备试剂:
无水乙醇
保存条件:
室温(15~25℃)
产品简介:
适用于从多种真菌的不同部位的组织中快速提取高质量的基因组DNA,du特配方的缓冲液体系能有效去除植物组织中的多糖、多酚复合物和酶抑制剂,基因组DNA选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心等步骤,去除其他杂质。提取过程不需要氯仿等有机试剂抽提,安全快捷。使用本Kit提取的植物基因组DNA,可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。
产品特点:
1. 简便快速:30 min 内可获得高纯度的基因组 DNA。
2. 纯度高:OD260/280=1.7~1.9,可直接进行PCR、酶切和杂交等实验。
3. 安全无毒:安全、无毒,无需苯fen/lv仿抽提。
注意事项:
1. 若Buffer LP1或Buffer LP3有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用。
2. 所有离心步骤均需要使用台式离心机,室温下离心。
3. 按要求在Buffer LP3和Buffer WB2中加入无水乙chun。
操作步骤:
第一次使用前,请先在 Buffer LP3和 Buffer WB2中加入指ding量无水乙醇,加入体积详见瓶身的标签。
提示:所有离心步骤必须在室温(15~25℃)下进行。
1. 取真菌新鲜组织100mg或干重组织20mg,加入液氮充分碾磨,倒入
1.5ml离心管中。
2. 加入400μl Buffer LP1和4μl RNase A(10mg/ml),旋涡振荡 1min,室温放置10min。
3. 加入130μl Buffer LP2,充分混匀,旋涡振荡1min。
4. 12,000 rpm 离心 5 min,将上清移至新的离心管中。
(注意:只取上清液,不要吸取沉淀组织,大约 400μl 左右)
5. 加入1.5倍体积的Buffer LP3(例:400μl上清液加600μl Buffer LP3),立即充分振荡混匀 15 sec,此时可能会出现絮状沉淀。
6. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都转入到吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30sec,DNA被吸附在膜上,弃收集管中废液。
(注意:吸附柱的最大容量是750μl,超过此体积,可分2次进行)
7. 向吸附柱内加入 500μl 的 Buffer WB2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中废液。
(注意:如果吸附柱膜呈现绿色,可向吸附柱中加入500μl无水乙醇,
12,000rpm离心30sec,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中)
8. 重复步骤 7一次。
9. 室温12,000rpm离心2min,甩干吸附膜上的残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
10. 取出吸附柱,放入一个新的 1.5ml 离心管(自备)中,在吸附膜的中央加入 50~100μl Buffer EB,室温放置 2 min,12,000 rpm 离心 1 min,管底溶液即基因组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液 Buffer EB 在 60℃预热。如果需要使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其 pH 值在 7.0~8.5之间,为了增加 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置 2 min,再次离心收集)
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