CTAB植物基因组DNA快速提取试剂he-现货
适用于快速提取植物基因组DNA改进的经典 CTAB 植物 DNA 抽提液内（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，氯仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质（根据需要，上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组 DNA，进一步去除其它各种杂质）CTAB植物基因组DNA快速提取试剂he-现货
CTAB植物基因组DNA快速提取试剂he（离心柱型）
CTAB植物基因组DNA快速提取试剂he-现货
目录号：40114
目录编号 | 包装单位 |
40114-50 | 50次 |
40114-100 | 100次 |
40114-200 | 200次 |
适用范围：
适用于快速提取植物基因组DNA
试剂盒组成、储存、稳定性：
试剂盒组成 | 保存 | 50次 | 100次 | 200次 |
裂解液PL | 室温 | 40ml | 80ml | 75ml×2 |
结合液PQ | 室温 | 15ml | 25ml | 25 ml×2 |
第一次使用前按说明加指ding量乙醇 | ||||
抑制物去除液IR | 室温 | 25ml | 50ml | 100ml |
漂洗液WB | 室温 | 13ml | 25ml | 25ml×2 |
第一次使用前按说明加指ding量乙醇 | ||||
洗脱缓冲液EB | 室温 | 15ml | 15ml | 40ml |
DNA 吸附柱 | 室温 | 50个 | 100个 | 200个 |
收集管（2ml） | 室温 | 50个 | 100个 | 200个 |
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
储存事项:
1. 裂解液PL、结合液 PQ或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在 55℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：
改进的经典CTAB植物DNA抽提液内（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，氯仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质（根据需要，上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组 DNA，进一步去除其它各种杂质），然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 不需要使用有毒的苯fen等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
3. 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达
4. 1.7～1.9，长度可达30kb -50kb，可直接用于 PCR，Southern-blot和各种酶切反应
注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备氯仿/异戊醇（体积比24：1混合）、无水乙醇和β-巯基乙chun。
4. 结合液PQ和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱 （10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
标准操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：
ð 第一次使用前请先在漂洗液WB和结合液PQ中加入指ding量的无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
ð 取所需适量裂解液PL放置在 65℃预热，使用前加入β-巯基乙chun到终浓度2%。
1. 取适量植物组织（新鲜组织100mg或干重组织30mg）在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
2. 转移细粉到一个1.5ml离心管，不要解冻，加600μl 65℃预热的裂解液PL(确认已加入β-巯基乙chun至 2%)，剧烈涡旋振荡混匀，用大口径枪头轻柔吹打帮助裂解。
（如果组织裂解困难，可根据需要加一个轻柔匀浆 10 秒的步骤帮助裂解。）
3. 65℃水浴 20-60 分钟，在水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
（可选:如果组织干燥或者产量低，可以适当延长水浴时间。如果 RNA 残留多，可在水浴前加入 6μl RNA 酶（20mg/ml）。）
4. 加入700μl氯仿/异戊醇（体积比 24：1混合），颠倒充分混匀几分钟（或者涡旋混匀），13,000rpm离心5分钟。
（若提取的植物组织富含多糖多酚，可以在第 4 步前用等体积酚/氯仿（1：1）抽提一遍。）
5. 小心吸取上清到一个新的1.5ml离心管，注意不要吸到界面物质。
（如上清比较浑浊，则需要重复步骤4一遍，直到得到透亮上清。）
6. 较精确估算上清量，加入 1.5 倍体积结合液 PQ （请先检查是否已加入无水乙醇!）
后立刻涡旋，充分混匀。此时可能出现沉淀，但不影响实验结果。
7. 将上一步所得混合物（包括可能出现的沉淀）加入一个 DNA 吸附柱中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液（先加 700μl 离心，弃废液，再加入剩余的溶液，再次离心）。
8. 加入 500μl抑制物去除液 IR，12,000rpm 离心 30 秒，弃废液。
9. 加入700μl漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm离心 30秒，弃掉废液。
10. 加入500μl漂洗液 WB，12,000rpm离心30秒，弃掉废液。
11. 将DNA吸附柱放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
12. 取出DNA吸附柱，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中央加 100μl洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中预热），室温放置 3-5分钟，12,000rpm离心1分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000rpm离心1分钟。
（洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果预计和需要产量高，可增大洗脱体积，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于 50μl，体积过小降低 DNA洗脱效率，减少DNA产量。）
13. DNA可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。
附录（低DNA含量或者产量低样品操作步骤）：
1. 取适量植物组织（新鲜组织400mg或干重组织200mg）在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
2. 转移细粉到一个15ml离心管，不要解冻，加入9ml 65℃预热的裂解液PL(确认已经加入 β-巯基乙chun至 2%)，剧烈涡旋振荡混匀，用大口径枪头吹打帮助裂解。
（如果组织裂解困难，可根据需要加一个轻柔匀浆 10 秒的步骤帮助裂解。）
3. 室温放置 60分钟，中间不时颠倒离心管以混合样品数次。
（如果组织干燥或者产量低，可以放置在 65℃水浴。）
4. 加 4.5ml氯仿/异戊醇（体积比24：1混合），涡旋充分混匀，3,000g离心10分钟。
5. 小心吸取上清到一个新的15ml离心管，注意不要吸到界面物质。重复一遍步骤 4。
6. 小心吸取上清到一个新的15ml离心管，估算上清量，加入0.7倍体积的异丙醇，涡旋混匀来沉淀DNA。
7. 立刻 3,000g离心20分钟沉淀 DNA，弃上清，颠倒离心管口放在纸巾上控干残留液体，并小心用用移液枪吸干沉淀周围残留液体（不要过于干燥 DNA 沉淀）。
8. 加入300μl－400μl预热到 65℃的灭菌水，重新溶解DNA，可能需要在 65℃短暂温育帮助溶解，期间不断轻弹管底帮助溶解。
9. 加入1.5倍体积结合液 PQ（450μl－600μl，请先检查是否已加入无水乙醇!）后立刻涡旋，充分混匀。此时可能出现沉淀，但不影响实验结果。
10. 后续步骤和上面标准操作步骤7开始后wan全一样。
CTAB植物基因组DNA快速提取试剂he-现货
