细菌总RNA提取试剂盒 核酸提取
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit 是专用于提取细菌（G+、G-）的总 RNA，全新的裂解液没有任何味道，提取过程也不需要使用氯仿，提取的产量和纯度媲美进口一线品pai。细菌总RNA提取试剂盒 核酸提取
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit
细菌总 RNA 快速提取试剂盒（免lv仿）
细菌总RNA提取试剂盒 核酸提取
目录号：91018
产品内容
产品成份 | 91018-50（50 次） |
溶菌mei | 20 mg |
TE (PH 8.0) | 6 ml |
裂解液 BRL | 25 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 离心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自备试剂
无水乙醇
保存条件
溶菌mei，常温运输， 4℃保存；其他组分，室温（15 ~ 25℃）保存。
产品简介
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit 是专用于提取细菌（G+、G-）的总 RNA，全新的裂解液没有任何味道，提取过程也不需要使用氯仿，提取的产量和纯度媲美进口一线品pai。得到的 RNA，可直接用于 RT、RT-PCR、RT-qPCR、RACE、全转录组测序、芯片等。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品特点
1. 无毒：免lv仿、免β-巯基乙chun！
2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！
3. 高效：提取全过程仅需 10 min！
注意事项
1. 样品应避免反复冻融，否则会影响 RNA 的提取得率和质量。
2. 样品加入裂解液 BRL Plus 匀浆后，样品可在–80℃保存一个月以上。
3. 提取过程应使用不含 RNase 的吸头和器皿。
重要提示：
① 第一次使用前，请先在漂洗液 RW 中加入无水乙醇，详见瓶身的标签。
② 每次操作前，请先配制添加了溶菌mei或者 Lysostaphin 的 TE (PH 8.0)，终浓度为 1mg/ml。
③ 所有离心步骤均需要在室温（15~25℃）下进行。
操作步骤：
1. 离心收集 1~2 ml 菌液(108~109细胞)到一个 1.5 ml 离心管, 尽可能che底吸弃上清。
2. 根据细胞的种类和数量，充分重悬细胞在 100 μl ( 5x108细胞 ) / 200 μl( 5x108~7.5x108细胞 ) TE 中（确保已添加溶菌mei或者 Lysostaphin 至TE 中，浓度为 1mg/ml )，或者直接用 TE 重悬后，用干净枪头挑取少许溶菌mei加入。
3. 室温(15~25℃)温育5min/溶菌mei, 或者37℃温育15min / Lysostaphin，破解细胞壁。每 2 min 涡旋振荡 10 sec，帮助破壁。
注意：各种细菌破壁的难易程度不一样，一般革兰氏阴性菌 E.coli 使用上面的条件就足够了，甚至可能省略该步骤，但是某些革兰氏阳性菌如B. subtilis 难破壁需要提高溶菌mei浓度到 15mg/ml 和温育时间到10min。如果金黄色葡萄球jun需要加入 lysostaphin 到 1mg/ml，37℃温育 15min。总之不同细菌类型破壁难易程度不同，有的难破壁的种类
需要根据用户自己的具体情况调节酶的种类、工作浓度和温育温度、时间，此外还可以联合使用玻璃珠击打，机械破壁，蛋白酶 K 消化等方法帮助破壁。
4. 加入350μl裂解液 BRL（ 如果上面使用 100 μl TE/酶 ）或者700μl裂解液 BRL（如果上面使用 200 μl TE/酶），吹打混匀后，用手剧烈振荡20 秒，充分裂解。
5. 加入 250 μl 无水乙醇（曾加入 100 μl TE / 350 μl BRL 管）或者 500 μl无水乙醇（曾加入200μl TE / 700μl BRL 管），立即吹打混匀。
6. 每次转移≤750 μl 滤液混合液至 RNA 吸附柱中（吸附柱放入收集管中），13,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。此时，RNA 被吸附在膜上，重复此过程，直到溶液全部上柱。
7. 加入 700 μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1min，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。
8. 加入 500 μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去乙醇。
11. 取出 RNA 吸附柱，放入一个新的 RNase-free 1.5 ml 离心管中，向 RNA吸附膜的中央悬空滴加 30-50 μl RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min。
12. 得到的 RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。
相关产品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (适用于所有 qPCR 仪)
细菌总RNA提取试剂盒 核酸提取
