天恩泽即用型高保真PCR试剂盒
天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品简介:产品品牌:天恩泽产品名称:即用型高保真PCR试剂盒英文名称:Instant HiFi PCR Kit产品货号:90708-1.5产品规格:1.5 mL产品价格:150元
天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5
我们北京诺博莱德公司作为天恩泽公司的代理商,先简单介绍一下天恩泽公司:
北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上,公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验;公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验;同样,公司的运营团队也有丰富的执行经验。
北京天恩泽公司充分了解客户的需求,并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长,成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。
我们北京诺博莱德科技有限公司作为天恩泽公司的代理,为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。
天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品简介:
产品品牌:天恩泽
产品名称:即用型高保真PCR试剂盒
英文名称:Instant HiFi PCR Kit
产品货号:90708-1.5
产品规格:1.5 mL
产品价格:150元
运输:低温运输,-20℃保存
保存:负20℃
有效期:1年
货期:1-2天
天恩泽即用型高保真PCR试剂盒 90708-1.5,产品特点:
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有 PCR试剂,包括 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、
上样染料等,特别适合于高保真 PCR 反应。
1. Pfu DNA 聚合酶是使用bijiaoguang泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的 10 倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了 PCR 的准备工作。
3. PCR 反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 本产品含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
6. 适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的 PCR 产物可用于平末
端克隆。
规格及成分
成份 | 编号 | 塑料袋包装 |
2×高保真PCR MagicMix | 90708a | 1.5 mL(黄盖) |
使用手册 | 90708sc | 1 份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为12 个月。
自备试剂:模板和引物。
使用方法:
将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30 uL 反应体系) 加入PCR管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15 uL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是 30 uL,各成分需要按比例增加或减少。
2×高保真 PCR MagicMix | 15 uL |
DNA 模板(自备) |
|
哺乳动物基因组 DNA | 0.5-1 ug |
酵母基因组 | DNA 5-500 ng |
细菌基因组 DNA | 0.5-50 ng |
质粒 DNA | 5-500 pg |
PCR回收pian段 | 1-100 pg |
PCR 引物(自备) | 10-20 pmol each |
补水到 | 30 uL |
放入 PCR仪中进行PCR。由于含有电泳示踪剂(注意:不是溴化乙锭等 DNA染料),故PCR结束后可以取5-10 uL 直接上样电泳, 红色染料电泳速度相当于50 bp DNApian段。
参考扩增条件:
预变性 | 94℃ | 4 min |
PCR (30 个循环) | 94℃ | 30 s |
50℃ | 30 s | |
68℃ | 0.5kb/ min | |
延伸 | 68℃ | 10 min |
注意:
1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低,因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每 kb 需2 分种。
2. Pfu 酶3’ -5’外切酶活性可降解引物,所以强烈建议在冰上配置完成 PCR 反应液后,立即放入 PCR仪中进行扩增,扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端,不可以直接进行 TA 克隆,可以使用克必隆 B 载体(CAT#:51104)进行克隆。如需要进行TA 克隆,建议对PCR产物纯化后,用加A 试剂盒(CAT#:60105)加 A后再进行 TA 克隆。
4. 由于 Pfu 无 5’到 3’外切酶的活性,所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR 。
疑难解答
Q:为何 Pfu DNA Polymerase 扩增效率不如Taq DNA Polymerase?
A:一是由于Pfu DNA Polymerase 具有 3’-5’的外切活性,所以在合成过程中,该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对,影响了合成效率;二是它能通过3’-5’的外切活性使引物部分降解,降低引物结合模板的能力,进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q:使用本产品时还有哪些注意事项?
A: 1.引物长度和浓度一般应比常规的 PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3’-5’的外切活性降解的因素);
2.在反应前加Pfu DNA Polymerase。
相关资料
常见耐热 DNA 聚合酶的保真性
DNA 聚合酶名称 | 错配率 (X10-6) | jingque度 (1/错配率) |
单成分酶Pfu Ultra | 0.4±0.04 | 2,500,000 |
Pfu,PfuTurbo | 1.3±0.2 | 770,000 |
Tgo | 2.2±0.1 | 450,000 |
Deep Vent | 2.7±0.2 | 370,000 |
Vent | 2.8±0.9 | 360,000 |
Platinum Pfx | 3.5±1.0 | 290,000 |
Taq | 8.0±3.9 | 125,000 |
酶混合物 Herculase | 2.8±0.5 | 360,000 |
|
|
|
TaqPlus Precision | 4.0±1.3 | 250,000 |
Platinum Taq High Fidelity | 5.8±0.3 | 170,000 |
Fidelity Advantage HF | 6.1±0.07 | 160,000 |
注:Pfu Ultra和Pfu,PfuTurbo都是来源于Pyrococcus furiosis,各文献中报道的数据间可能有差异,这跟实验体系的不同有关。
关联产品:PCR抑制物清除剂(CAT#:60804)
以下是天恩泽品牌部分热销产品,如需其他品牌产品请咨询本店客服:
品牌 | 产品货号 | 货品名称 | 规格 |
天恩泽 | 200101-50 | 第二代病毒采运试剂盒(低敏型)原拭子病毒采运试剂盒,核酸诊断用 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200201-50 | 第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200601-50 | 荧光及可视化LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200603-50 | 荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200108-2.5L | xinguan病毒灭活液A型 | 2.5L/瓶 |
天恩泽 | 91103-250 | 非冻型拭子病毒保存液 | 250ml/瓶 |
天恩泽 | 15-81920 | SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 16-81920 | SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 15-23000 | African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 16-23000 | African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 15-29420 | Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 71201-50 | 柱式动物RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 71001-50 | 柱式病毒RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 60705-50 | 一管式植物DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 3070-100 | 动物RNA提取试剂盒(TRIzol) | 100mL/瓶 |
天恩泽 | 81027-50 | TRIzol伴侣 | 50次/套 |
天恩泽 | 70701-50 | 柱式病毒DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 3674-50 | 一管式病毒DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 90404-50 | 柱式植物RNA提取试剂盒2.0 | 50次/套 |
天恩泽 | 60802-50 | 柱式细菌DNA提取试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 71203-50 | 柱式植物RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 60602-50 | 柱式植物DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 90315-250 | 非冻型尿液DNA保存液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3660-250 | 非冻型组织DNA保存液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3060-250 | 非冻型组织RNA保存液 | 250m/瓶 |
天恩泽 | 90805-10 | 即用型PCR试剂盒3.0 | 1ml×10/盒 |
天恩泽 | 90708-1.5 | 即用型高保真PCR试剂盒 | 1.5mL/瓶 |
天恩泽 | 90408-1 | 2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix) | 1ml/管 |
天恩泽 | 190303-1 | 2X 探针法qPCR Mix (TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒) | 1ml/管 |
天恩泽 | 101005-100 | 即用型易错PCR试剂盒 | 100次/套 |
天恩泽 | 160903-100 | 可调式易错PCR试剂盒 | 100次/套 |
天恩泽 | 3090-250 | 天净沙RNase清除剂A型(原固相RNase清除剂) | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3091-1.5 | 天净沙RNase清除剂B型(原液相RNase清除剂) | 1.5mL/套 |
天恩泽 | 140648-250 | PCR污染清除剂 | 250 mL/瓶 |
天恩泽 | 70902-1.5 | PCR级甜菜碱溶液,5M | 1.5mL/管 |
天恩泽 | 100805B-250 | Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用) | 250ml/瓶 |
天恩泽 | 130502-50 | 无内毒素水 | 50mL/瓶 |
天恩泽 | 160251-250 | 4%中性甲醛固定液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 100302-100 | 包涵体蛋白溶解及复性套装 | 100次/次 |
天恩泽 | 200604 | 核酸释放剂(DNA-RNA通用型) | 300次/盒 |
天恩泽 | 61202-10 | 天净沙核酸释放剂 | 10mL/瓶 |
天恩泽 | 70303-1.5 | 绿如蓝核酸染料(UV) | 1.5mL/管 |
天恩泽 | 70503 | DNA电泳分子量标准系列 | 50次/管 |
天恩泽 | 小师弟 | 高压快速电泳预制胶 | 10块/盒 |