天恩泽2X染料法荧光定量PCR Mix
天恩泽2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)90408-1,产品简介:产品品牌: 天恩泽产品名称: 2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)英文名称: SYBR qPCR Mix产品货号: 90408-1产品规格: 1mL天恩泽2X染料法荧光定量PCR Mix
天恩泽2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)90408-1
我们北京诺博莱德公司作为天恩泽公司的代理商,先简单介绍一下天恩泽公司:
北京天恩泽公司的目标是研发出技术先进、质量稳定、价格合理的试剂精品。公司的创立宗旨是技术至上、质量至上、服务至上,公司的产品研发团队均为高学历并在海外有长期的科研经验;公司的管理团队已在行业内拥有超过20年管理经验;同样,公司的运营团队也有丰富的执行经验。
北京天恩泽公司充分了解客户的需求,并努力创新以满足客户不断发展的需求。我们将与我们的客户共同成长,成为生物技术领域中zhuoyue产品和服务的jijia提供者。
DNAout、RNAout、Erasol、天净沙、克必隆、归去来、好亦多均为天恩泽基因注册商标(试剂类)。
天恩泽2X染料法荧光定量PCR Mix
我们北京诺博莱德科技有限公司作为天恩泽公司的代理,为客户提供,正规进口,保证原装正品,货期稳定,折扣好的服务标准。
天恩泽2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)90408-1,产品简介:
产品品牌: 天恩泽
产品名称: 2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)
英文名称: SYBR qPCR Mix
产品货号: 90408-1
产品规格: 1mL
产品价格: 150元
低温运输,-20℃保存
保存:负20℃
有效期:1年
货期:1-2天
天恩泽2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix)90408-1,产品特点:
本产品是基于荧光染料检测的即用型 PCR 试剂盒,可以对靶片段进行实时定量 PCR 分析(quantitative PCR、qPCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料 DNAgreen 等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量 PCR 反应和 HRM 分析,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量 PCR 实验和 HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于 SYBR Green I 和 LC Green染料的 qPCR mix 则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR 反应。
3. 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50 拷贝/mL 的靶分子。
规格及成分
成 份 | 编 号 | 塑料袋包装 | 塑料袋包装 |
2×SYBR qPCR MagicMix | 90408 | 1 mL(棕色盖) | 1 mL×6 |
使用手册 | 90408sc | 1 份 | 1 份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为6 个月。
自备试剂:DNA 模板、引物、超纯水。
使用方法:
1. 以 20 uL的 qPCR反应体系为例:在一干净的 PCR管中,加入下列成分:
反应体系成分 | 20 uL体系 | 终浓度 |
2×SYBR qPCR MagicMix | 10 uL | 1× |
自备引物一 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备引物二 a | x uL | 0.1-0.5 uM |
自备模板 a | x uL |
|
自备 ROXb | 2 uL | (可以不加) |
补超纯水到 | 20 uL |
|
放入荧光 PCR仪中进行扩增, 并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a) 通常引物浓度以 0.2 μM可得到较好结果,可以终浓度 0.1-1.0 μM 作为设定范围的参考;通常 DNA 模板的量以 10-100 ng 基因组 DNA 或1-10 ng cDNA 为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,
以确定shihe的模板使用量。
b) ROX 校正染料:如果使用 ABI 公司的 7500,7700 和 7900 三种型号的荧光PCR 仪器,则需用自备的ROX 进行 Ct 值校正。对ABI 7700 和7900,ROX的浓度为1×( 即在每20 uL 反应体系中加2 uL 10×ROX) 。对 ABI 7500,ROX 的浓度为0.05-0.1×(每20 uL 反应体系加0.1-0.2 uL 10×ROX;也可将 10×ROX 稀释到1×,然后每个反应体系加入 1-2 uL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。 对于 iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000, RotorGene3000,RotorGene 6000 和 LightCycler 480 等型号的荧光PCR仪器,ROX 不是必须的,但加入的话也不会影响整个 PCR 分析。
2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。
A:两步快速循环法:适用于引物 Tm 值设计为60℃的反应
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火&延伸 | 95℃ 60℃ | 15 s 1 min | 35-40 |
注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min 条件下实现酶的活化。退火温度请以 60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
B:三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火 延伸 | 95℃ 56-64℃d 72℃ | 10 s* 30 s 32 s | 35-40 |
注意:
a) 退火温度:建议采用两步法 PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm 值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。延伸温度:延伸温度设为 72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT 含量大于 70%的扩增子来说,延伸温度设为 60℃为宜。
C:通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环
法不能扩增的模版。
循环步骤 | 温度 | 时间 | 环数 |
酶活化 | 95℃ | 10 min | 1 |
变性 退火&延伸 | 95℃ 60℃ | 15 s 60 s | 35-40 |
3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合 DNA 时,大吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的大吸收光谱在 500nm,大发射光谱在530nm。
其他注意事项:
1. 如果使用 iCycler,可以不加入 FAM。
2. 如果使用 Roche LightCycler 的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备 BSA。
天恩泽2X染料法荧光定量PCR Mix
关联产品:探针法 qPCR MagicMix.
以下是天恩泽品牌部分热销产品,如需其他品牌产品请咨询本店客服:
品牌 | 产品货号 | 货品名称 | 规格 |
天恩泽 | 200101-50 | 第二代病毒采运试剂盒(低敏型)原拭子病毒采运试剂盒,核酸诊断用 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200201-50 | 第三代免提核酸提取病毒采运试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200601-50 | 荧光及可视化LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200603-50 | 荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 200108-2.5L | xinguan病毒灭活液A型 | 2.5L/瓶 |
天恩泽 | 91103-250 | 非冻型拭子病毒保存液 | 250ml/瓶 |
天恩泽 | 15-81920 | SARS-CoV-2冠状病毒N基因探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 16-81920 | SARS-CoV-2冠状病毒N基因荧光及可视化RT-LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 15-23000 | African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 16-23000 | African Swine Fever Virus(ASFV)非洲猪瘟病毒LAMP试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 15-29420 | Yersinia pestis鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 71201-50 | 柱式动物RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 71001-50 | 柱式病毒RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 60705-50 | 一管式植物DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 3070-100 | 动物RNA提取试剂盒(TRIzol) | 100mL/瓶 |
天恩泽 | 81027-50 | TRIzol伴侣 | 50次/套 |
天恩泽 | 70701-50 | 柱式病毒DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 3674-50 | 一管式病毒DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 90404-50 | 柱式植物RNA提取试剂盒2.0 | 50次/套 |
天恩泽 | 60802-50 | 柱式细菌DNA提取试剂盒 | 50次/盒 |
天恩泽 | 71203-50 | 柱式植物RNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 60602-50 | 柱式植物DNA提取试剂盒 | 50次/套 |
天恩泽 | 90315-250 | 非冻型尿液DNA保存液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3660-250 | 非冻型组织DNA保存液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3060-250 | 非冻型组织RNA保存液 | 250m/瓶 |
天恩泽 | 90805-10 | 即用型PCR试剂盒3.0 | 1ml×10/盒 |
天恩泽 | 90708-1.5 | 即用型高保真PCR试剂盒 | 1.5mL/瓶 |
天恩泽 | 90408-1 | 2X 染料法荧光定量PCR Mix(2x SYBR qPCR Mix) | 1ml/管 |
天恩泽 | 190303-1 | 2X 探针法qPCR Mix (TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒) | 1ml/管 |
天恩泽 | 101005-100 | 即用型易错PCR试剂盒 | 100次/套 |
天恩泽 | 160903-100 | 可调式易错PCR试剂盒 | 100次/套 |
天恩泽 | 3090-250 | 天净沙RNase清除剂A型(原固相RNase清除剂) | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 3091-1.5 | 天净沙RNase清除剂B型(原液相RNase清除剂) | 1.5mL/套 |
天恩泽 | 140648-250 | PCR污染清除剂 | 250 mL/瓶 |
天恩泽 | 70902-1.5 | PCR级甜菜碱溶液,5M | 1.5mL/管 |
天恩泽 | 100805B-250 | Tris饱和酚-lvfang-yiwuchun混合液(DNA提取用) | 250ml/瓶 |
天恩泽 | 130502-50 | 无内毒素水 | 50mL/瓶 |
天恩泽 | 160251-250 | 4%中性甲醛固定液 | 250mL/瓶 |
天恩泽 | 100302-100 | 包涵体蛋白溶解及复性套装 | 100次/次 |
天恩泽 | 200604 | 核酸释放剂(DNA-RNA通用型) | 300次/盒 |
天恩泽 | 61202-10 | 天净沙核酸释放剂 | 10mL/瓶 |
天恩泽 | 70303-1.5 | 绿如蓝核酸染料(UV) | 1.5mL/管 |
天恩泽 | 70503 | DNA电泳分子量标准系列 | 50次/管 |
天恩泽 | 小师弟 | 高压快速电泳预制胶 | 10块/盒 |