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对于胎牛血清的使用及保存还不知道的就赶紧看看本篇吧
发布时间:2022-11-11   点击次数:96次
  胎牛血清在科研市场上应用广泛相信大家都知道。但对于胎牛血清的使用及保存,并不是所有人都那么清楚,今天小编就以胎牛血清的储存、常见问题及处理方法进行分析,建议收藏!
 
  1.如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
 
  未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。
 
  将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
 
  总而言之:血清推荐在-10至-20℃条件储存,并避免反复冻融。
 
  2.血清中絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
 
  1.将冷冻保存的血清取出后,置4℃冰箱静止过夜;
 
  2.待血清融化后,上下颠倒,轻轻混匀,继续4℃2-3小时;
 
  3.轻轻吸取上层血清,分装,余底下50ml左右;
 
  4.低速离心5分钟,去掉沉淀。
 
  若解冻后发现有絮状沉淀物出现,该怎么处理?
 
  胎牛血清中沉淀物的出现有许多种原因,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。
 
  若欲去除这些絮状沉淀物,可以将胎牛血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
 
  解冻胎牛血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
 
  请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。
 
  3.如何避免血清中产生沉淀?
 
  1.解冻时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一;
 
  2.分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡);
 
  3.切勿由-20℃直接至37℃水浴锅解冻,较大的温差,易造成蛋白质凝结而发生沉淀;
 
  4.切勿将血清置于37℃过长时间,否则可能使之浑浊,其中一些不稳定的组分也会因此受到影响,最终降低血清的品质;
 
  5.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤;
 
  6.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
 
  4.血清中的“黑胶虫”是怎么回事?
 
  在细胞培养的时候,有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动,类似布朗运动,这种小黑点既不是细菌、霉菌,也不是支原体,目前业内人士称其为“黑胶虫”。
 
  黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。黑胶虫一般是存在血清里的,而血清通常是经过0.1μm滤膜过滤的,所以血清里不可能存在细菌、霉菌及支原体等微生物。如果说黑胶虫不是生物,它会不断增多,达到一定数量时会与细胞竞争性生长,与细胞竞争培养基中的营养,从而使得细胞营养不足而死亡。

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